Kotahi Hipanga RT-qPCR SYBR Green Premix
Cat Nama: HCB5140A
One Step RT-qPCR Syber Green Premix is for fluorescence quantification based on SYBR Green I dye.Ma te whakamahi i nga ira-a-ira, ka oti te tuhi whakamuri me nga tauhohenga qPCR i roto i te ngongo kotahi, ka whakakorehia te hiahia mo te whakatuwhera i te potae me nga mahi paipa, ka tino whakapai ake i te pai o te whakamatautau me te whakaiti i te tupono o te poke.Mo nga tauira RNA, ka whakamahia e te kete te Reverse Transcriptase whakamuri wera mo te whakahiato cDNA pai me te HotStart Taq DNA Polymerase mo te whakanui ine.I raro i te punaha buffer papaitia, ko te tairongo o te kete ka taea te teitei ki te 0.1 pg mo nga whaainga tino whakahuahia me te teitei ki te 1 pg mo nga whaainga kua tohua.He pai te kete mo te whakanui me te ine i nga tauira DNA.Ka taea e ia te kimi me te ine ine o nga waikawa karihi mai i nga momo tipu me nga tauira kararehe, nga pūtau me nga microorganisms.
Waehanga
| No | Ingoa | Rōrahi | Rōrahi |
| 1 | Kaipupuri Arā Atu Anō | 250 μL | 2×1.25 mL |
| 2 | Whakaranu Enzyme Arā Atu Anō | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNase Free H2O | 250 μL | 2×1.25 mL |
Nga Tikanga Rokiroki
Me penapena tenei hua ki te -25~-15 ℃ tawhiti atu i te marama mo te 1 tau.
Tohutohu
1.Reaction whirihoranga pūnahad
| Waehanga | Rōrahi (μL) | Rōrahi (μL) | Te kukū whakamutunga |
| Kaipupuri Arā Atu Anō | 12.5 | 25 | 1× |
| Whakaranu Enzyme Arā Atu Anō | 1 | 2 | - |
| Pūmua Whakamua (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| Pūmua Whakamuri (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| RNA Tampelb | X | X | - |
| RNase Free H2Oc | ki te 25 | ki te 50 | - |
Tuhipoka:
1) a.Tko te 0.2 μmol/L te kukū tuatahi, ka taea hoki te whakatika i waenga i te 0.1 me te 1μmol/L ina tika.
2) b.Ko te reagent he tino tairongo, me te Tapeke RNA i roto i te awhe o te 1pg-1μg, me te whakamatautau i nga tauira tangata i whakaatu i te whakauru tino pai o te 1 pg-100 ng, te whakahaere mo te uara Ct katoa i roto i te awhe o te 15-30 e tika ana.
3) c.E taunaki ana ki te whakamahi i te 20μL, 50μL ranei hei whakarite i te whaimana me te reproducibility o te whakanui ira ira.
4) d.Whakapaia koa i roto i te tauera ultra-ma me te whakamahi i nga tohutohu kore-waahi karihi me nga ngongo tauhohenga;Ka tūtohuhia nga tohutohu me nga kaata tātari.A ape i te paheketanga whakawhiti me te poke aerosol.
2.Hotaka tauhohenga
| Huahi huringa | Temp. | Te wa | Nga huringa |
| Whakamuri whakamuri | 50 ℃a | 6 meneti | 1 |
| Te whakahekenga tuatahi | 95℃ | 5min | 1 |
| Tauhohenga whakakaha | 95℃ | 15 hēkona | 40 |
| 60 ℃b | 30 hēkona | ||
| Te wahanga pihi rewa | Taputapu Taunoa | 1 | |
Tuhipoka:
1) a.Ka taea te kowhiri i te pāmahana tuhi whakamuri i waenga i te 50-55°C i runga i nga hiahia whakamatautau.Mo nga tauira DNA, ka taea te whakakore i te tukanga whakawhiti whakamuri.
2) b.I roto i nga take motuhake ka taea te whakarite i te pāmahana whakaene/ toronga kia rite ki te uara Tm tuatahi, e taunaki ana kia 60°C.
Notes
1. Ko tenei hua mo te rangahau anake.
2. Tena koa me mahi me nga koti taiwhanga me nga karapu tuku, mo to haumaru.
